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発現ベクターである。 大腸菌で複製する。 アンピシリン耐性因子をもつ。 ラクトースオペロンのプロモーターをもつ。 βグルコシダーゼのＣ末端に目的タンパク質を融合する。

RT-PCR法 アフィニティクロマトグラフィー法 電気穿孔法 リポフェクション法 アルカリSDS法

ジデオキシ法 DNAマイクロアレイ法 サザンブロッティング 制限酵素マッピング 遺伝子ターゲティング

遺伝子組み換え大腸菌 プラスミドDNA マウス組織より抽出したゲノム ヒト由来培養細胞 マウス肝臓

扉が壊れて閉まらなくなったが、そのまま実験を続けた。 実験中に悪臭が発生したので、窓を開放して実験を続けた。 実験の合間に消毒用アルコールのスプレーを使って実験台を拭いた。 研究室所属の人員がすべて組換え実験従事者であれば立ち入り禁止等の掲示…

制限酵素 RNaseH Taqポリメラーゼ 大腸菌DNAポリメラーゼＩ DNAリガーゼ

発現解析に用いられる mRNAを直接増幅する RNAポリメラーゼを利用する 3’側プライマーはセンス鎖の配列である リボヌクレオチドが反応の基質となる

環状二本鎖DNAである 選択マーカーとして抗生物質の耐性因子をもつ 宿主細胞内で複製される 制限酵素消化を受けない クローニングベクターとして利用される

染色体の異常 生物種がもつ全ての遺伝子 プロモーターの構造 タンパク質の一次構造 イントロンの配列

ポリアクリルアミドゲルを用いる。 SNPの解析に用いる。 プロモーターの構造に関する情報が得られる。 遺伝子発現を調べることが出来る。 抗体をプローブとして用いる。

サンガー法 サザンブロット法 制限酵素地図作製 RT-PCR法 FISH法

プロモーター配列 タンパク質の一次構造 イントロンの数 エキソンの数 遺伝子の大きさ

一本鎖DNAである。 鋳型より鎖長が長い。 鎖長が揃っている。 ３’側にプライマーの配列を含む。 20サイクルで千倍程度の増幅となる。

プライマー デオキシリボヌクレオチド 鋳型DNA 耐熱性のDNAポリメラーゼ 逆転写酵素

遺伝子発現を解析する方法である。 鋳型は不要である。 ジデオキシリボヌクレオチドを用いる。 ホスホジエステラーゼを用いる。 ５’プライマーと３’プライマーを組にして用いる。

スポンジ ペーパータオル プローブ アガロースゲル おもり

遺伝子の大きさ 遺伝子を発現している細胞の分布 生物種がもつ全ての遺伝子の数 プロモーターの構造 イントロンの配列

クレノウ断片を利用する。 末端標識法である。 γ位を標識されたヌクレオシド三リン酸を用いる。 プローブは鋳型と同じ鎖長となる。 RNAプローブが出来る。

ランダムプライム法にはRNAポリメラーゼを利用する。 cRNAプローブ合成にはN6ヘキサマーをプライマーとして用いる。 ポリヌクレオチドキナーゼは3'末端を標識する。 標識プライマーを用いると3'末端に標識が付く。 直鎖状DNA分子を鋳型にRNAポリメラーゼによ…

温度 有機溶媒濃度 鎖長 ミスマッチ塩基対数 TA塩基対比率

アガロース、アクリルアミドなどを支持体として利用する。 分子は陰極に向かって移動する。 大きな分子ほど易動度が大きい。 塩基配列の影響を大きく受ける。 環状DNAは直鎖状に較べて易動度が小さい。

熱に対し不安定である エキソヌクレアーゼ活性をもつ RNAを鋳型とする 至適温度は37℃である。 複製ミスが多い。

大腸菌DNAポリメラーゼＩ DNAリガーゼ RNase H S1ヌクレアーゼ DNase I

クレノウフラグメント 大腸菌DNAポリメラーゼI Taqポリメラーゼ DNaseI 逆転写酵素

エキソヌクレアーゼ ホスファターゼ ポリヌクレオチドキナーゼ エンドヌクレアーゼ DNAリガーゼ

16塩基対あたり一回 256塩基対に一回 4096塩基対に一回 65536塩基対に一回 10485676塩基対に一回

5'-GAA 5'-AATT 平滑末端 5'-AT 5'-GAATTC